Contenu théorique.
I. La chromatographie en phase gazeuse : rappels
a) Introduction – applications de la GC.
b) Analyse des constituants d'un GC :
- Les différentes phases mobiles, le four et les programmes de température.
- Les différents modes d'injection y compris la SPME et l'analyse de l'espace de tête.
- Les différents types de colonne et de phases stationnaires
c) La dérivatisation
II. La spectrométrie de masse
a) Définitions et principe général de la spectrométrie de masse.
b) Introduction de l'échantillon (introduction directe, les méthodes de couplage).
c) Les grandes méthodes d'ionisation en spectrométrie de masse (EI, CI, SIMS, FAB, MALDI, APCI, électrospray) et celles spécifiquement utilisées en GC-MS.
d) La séparation des ions.
e) La détection des ions : les différents analyseurs (magnétiques, à temps de vol, à filtres quadripolaires, à piégeage d'ions).
III. L'exploitation des résultats
a) L'analyse des spectres de masse (détermination de la formule moléculaire, la fragmentation, les réarrangements).
b) Les isotopes et leur utilisation pour l'analyse chimique et le dosage de molécules biologiques.
c) L'analyse qualitative y compris l'utilisation des librairies informatiques.
d) L'analyse quantitative.
Aspects pratiques.
Exercices d'interprétation de spectres de masse.
Démonstrations sur GC-MS et utilisation de ceux-ci ainsi que des logiciels de traitement des données.
Problèmes pratiques (analyses qualitatives et quantitatives de mélanges).
Exercices sur l'identification de molécules biologiques. |